當前位置:
首頁 > 資料下載 > 人(Human)前列腺素F2a(PGF2a)ELISA檢測試劑盒說明書
目錄導航 Directory
服務熱線
資料下載Down

人(Human)前列腺素F2a(PGF2a)ELISA檢測試劑盒說明書

提 供 商: 上海草莓视频18生物科技有限公司 資料大小:
圖片類型: 下載次數: 105 次
資料類型: PDF 瀏覽次數: 554次
相關產品:
文件下載    
詳細介紹

本試劑盒隻能用於科學研究,不得用於醫學診斷

人(Human前列腺素F2a(PGF2a)ELISA檢測試劑盒

使用說明書

檢測原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被前列腺素F2a(PGF2a)抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育並徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,並在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的前列腺素F2a(PGF2a)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。

樣品收集、處理及保存方法

1.  血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液後,3000轉離心10分鍾將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2.  血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鍾取上清。

3.  細胞上清液:3000轉離心10分鍾去除顆粒和聚合物。

4.  組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鍾取上清。

5.  保存:如果樣本收集後不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存於-20℃,避免反複凍融,在室溫下解凍並確保樣品均勻地充分解凍。

自備物品

  • 酶標儀(450nm)
  • 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
  • 37℃恒溫箱

操作注意事項

  1.   試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鍾。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶,這屬於正常現象,水浴加熱使結晶完全溶解後再使用。
  2.   實驗中不用的板條應立即放回自封袋中,密封(低溫幹燥)保存。
  3.   濃度為0的S0號標準品即可視為陰性對照或者空白;按照說明書操作時樣本已經稀釋5倍,最終結果乘以5才是樣本實際濃度
  4.   嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。
  5.   所有液體組分使用前充分搖勻。

試劑盒組成

名稱

96孔配置

48孔配置

備注

微孔酶標板

12孔×8條

12孔×4條

標準品

0.3mL*6管

0.3mL*6管

樣本稀釋液

6mL

3mL

檢測抗體-HRP

10mL

5mL

20×洗滌緩衝液

25mL

15mL

按說明書進行稀釋

底物A

6mL

3mL

底物B

6mL

3mL

終止液

6mL

3mL

封板膜

2張

2張

說明書

1份

1份

自封袋

1個

1個

注:標準品(S0-S5)濃度依次為:0、3、6、12、24、48 pg/mL

試劑的準備

 20×洗滌緩衝液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份的20×洗滌緩衝液加19份的蒸餾水。

洗板方法

  1.   手工洗板:甩盡孔內液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min後甩盡孔內液體,在吸水紙上拍幹,如此洗板5次。
  2.   自動洗板機:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。

操作步驟

  1.   從室溫平衡20min後的鋁箔袋中取出所需板條,剩餘板條用自封袋密封放回4℃。
  2.   設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
  3.   樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。
  4.   除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
  5.   棄去液體,吸水紙上拍幹,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍幹,如此重複洗板5次(也可用洗板機洗板)。
  6.   每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
  7.   每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。

結果判斷

 繪製標準曲線:在Excel工作表中,以標準品濃度作橫坐標,對應OD值作縱坐標,繪製出標準品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。

 

試劑盒性能

  •  準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關係數R值,大於等於0.9900。
  •  靈敏度:最DI檢測濃度小於1.0 pg/mL
  •  檢測範圍:1- 48 pg/mL。
  •  特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。
  •  重複性:板內、板間變異係數均小於15%。
  •  貯藏:2-8℃,避光防潮保存。
  •  有效期:6個月

免責聲明

  •   試劑盒僅供研究使用,不得用於臨床實驗或體實驗,否則所產生的一切後果,由實驗者承擔,本公司概不負責。
  •   嚴格按照說明書操作,實驗者違反說明書操作,後果由實驗者承擔。

 

實驗代做服務:

 

免疫組化IHC染色實驗服務

細胞、組織TUNEL凋亡染色實驗服務

試劑盒免費代檢測

實驗室代做實驗項目

 

透射電鏡服務實驗服務

石蠟/冰凍切片TUNEL凋亡

核仁組成區嗜銀-AGNOR染色實驗服務

免疫共沉澱(CHIRP)實驗

RNA結合蛋白免疫沉澱(RIP)實驗代做

酶聯免疫(ELISA)技術服務

雞傳染性法氏囊病病毒VP2抗體診斷試劑盒

喹諾酮類快速檢測試劑盒

組織芯片/微陣列定製技術服務

 

染色質免疫沉澱分析(CLIP)實驗服務

 

多因子液相芯片技術(Luminex)實驗

免疫細胞化學ICC實驗服務

ATP/ADP檢測實驗服務

蛋白雙向(2-D)電泳實驗服務

蛋白相互作用分析

堿性磷酸酶染色實驗服務

PKC活性檢測實驗

非標定量實驗

(Label-free)

 

DIGE技術實驗服務

端粒酶活性檢測實驗

細胞生長曲線的測定

掃描電鏡服務

NF-KB p65活性檢測實驗

 

慢病毒包裝實驗服務

聯係人
在線客服
用心服務成就您我

滬公網安備 31011802001676號